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产品详情
  • 产品名称:BD 556547 AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡双染试剂盒

  • 产品型号:556547、559763
  • 产品厂商:BD
  • 产品价格:2250
  • 折扣价格:0
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简单介绍:
BD 556547 AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡双染试剂盒 *经典的一款,江苏弘麒生物长期现货销售!BD 556547 AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡双染试剂盒。
详情介绍:

BD 556547 AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡双染试剂盒说明书
一、概述 
       在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧,细胞发生凋亡*早期,膜磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧,这一变化早于细胞皱缩、染色质浓缩、DNA片断化和细胞膜的通透性增加等凋亡现象。AnnexinV是一种磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此AnnexinV被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但凋亡中晚期的细胞和死细胞由于细胞膜通透性的增加,PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V与PI匹配使用,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。

二、BD 556547 AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡双染试剂盒的组份:            

Product code Description
556547         Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit I
Components:
556547a      Annexin V Binding Buffer, 10X conc (51-66121E
556547b      Annexin V-FITC (51-65874X)
556547c      Propidium Iodide Staining Solution(51-66211E)

            
三、BD 556547 AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡双染试剂盒的操作步骤 :
        贴壁细胞需用0.25%的胰酶消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的胰酶消化时,注意必须彻底**EDTA:在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤,**EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。
(1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer;
(2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的胰酶消化收集后(注:胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心5~10分钟,收集细胞;
(3)细胞洗涤:用预冷1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm离心5~10分钟,洗涤细胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞;
(5)Annexin V-FITC标记:加入5μL的Annexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
(6)PI标记:上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
(7)上机前,补加200μL的1×Binding Buffer。

四、BD 556547 AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡双染试剂盒的保存:

4℃保存,两个月内可保持稳定;避免反复冻融。

五、BD 556547 AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡双染试剂盒的注意事项 :
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态。
(5)在细胞洗涤的*后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
(6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
(7)PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首先进行Annexin V-FITC染色,*短可在上机前5分钟再加入PI染色。

 

检测凋亡细胞膜的变化

  • 磷脂酰丝氨酸检测:Annexin V试剂盒
    检测方法:FACS,荧光或光学显微镜
    正常细胞中,磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧,细胞发生凋亡早期,膜磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,它通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V是检测细胞早期凋亡的灵敏指标。将Annexin-V与PI匹配使用,可以将凋亡早晚期的细胞以及死细胞区分开来。

 

品牌

品名

货号

规格

Roche

Annexin-V-FLUOS

11828681001

500 μl (250 tests)

Annexin-V-Alexa 568

03703126001

500 μl (250 tests)

Annexin-V-Biotin

11828690001

500 μl (250 tests)

Annexin-V-FLUOS Staining Kit

11858777001

1 kit (50 tests)

11988549001

1 kit (250 tests)

BD

Annexin V : FITC Apoptosis Detection Kit I

556547

100 tests

Annexin V : FITC Apoptosis Detection Kit I

556570

100 tests

Annexin V : FITC Fluorescence Microscopy Kit

550911

25 Slides

Annexin V : PE Apoptosis Detection Kit I

559763

100 tests

检测凋亡细胞线粒体的变化

  • 线粒体通路:
    凋亡早期改变之一是线粒体外膜通透性增加。线粒体外膜透化的实现涉及到许多蛋白的参与,特别是Bcl-2家族成员。促凋亡的Bcl-2家族成员Bax及Bak有助于线粒体外膜透化,进而引起caspase9的活化;而抗凋亡的Bcl-2/Bcl-XL起到抑制凋亡的作用。

 

货号

品名

规格

612742

Bcl-2 Related Sampler Kit

10ul each

612741

Apoptosis I Sampler Kit

10ul each

检测凋亡细胞核的变化

  • DNA ladder:
    细胞凋亡时主要的生化特征是其染色质发生浓缩,染色质DNA在核小体单位之间的连接处断裂,形成50~300kbp长的DNA大片段,或180~200bp整数倍的寡核苷酸片段,在凝胶电泳上表现为梯形电泳图谱(DNA ladder)。

 

货号

品名

规格

Roche

11835246001

Apoptotic DNA-Ladder Kit

1 Kit (20Test)

11774425001

Cell Death Detection ELISA

1 kit (96 tests)

  • TUNEL(荧光,POD,AP,TMR)试剂盒
    细胞凋亡中, 染色体DNA 双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3‘-OH 末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3’-末端,从而进行凋亡细胞的检测,这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal-deoxynucleotidyl transferase ted nick end labeling, TUNEL)。由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA 的断裂,因而没有3‘-OH 形成,很少能够被染色。

 

品名

检测样本

规格

货号

Roche

In Situ Cell Death Detection Kit,AP

细胞涂片,贴壁细胞,细胞甩片,冷冻货固定组织切片

50T

11684809910

In Situ Cell Death Detection Kit,POD

50T

11684817910

In Situ Cell Death Detection Kit,Fluorescein

贴壁细胞,悬浮细胞,细胞涂片,冷冻或石蜡切片

50T

11684795910

In Situ Cell Death Detection Kit, TMR red

50T

12156792910

BD

Apoptosis Detection Kit (APO-Direct)

 

50 tests

556381

Apoptosis Detection Kit (APO-BRDU)

 

60 tests

556405

检测凋亡细胞胞质的变化

  • Caspase3
    Caspase-3正常以酶原的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段被激活,活化的Caspase-3由两个大亚基(17KD)和两个小亚基(12KD)组成,裂解相应的胞浆胞核底物,*终导致细胞凋亡。但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞,caspase-3的活性明显下降。

 

品牌

品名

货号

规格

BD

Caspase-3, Active Form, mAb Apoptosis Kit: FITC (CPP32)

550480

100 tests

Caspase-3, Active Form, Human ELISA Set

550930

5 plates

Roche

 

检测对象

检测方法

检测样品

品名

规格

货号

Caspase对角蛋白18的裂解作用

Western blot,流式细胞仪,荧光显微镜或光学显微镜(单细胞水平检测)

贴壁细胞,组织样本(福尔马林/石蜡包埋切片,恒冷箱切片)

M30 CytoDEATH

100 μl (250 tests)

12140349001

M30 CytoDEATH, Fluorescein

100 μl (250 tests)

12156857001

Caspase 3活性

荧光ELISA

细胞裂解产物,重组Caspase 3

Caspase 3 Activity Assay

96 tests

12012952001

Caspase

荧光ELISA

细胞裂解产物,重组Caspase

Homogeneous Caspases Assay, fluorimetric

100 tests on 96-well plates, 400 tests on 384-well plates

03005372001

Caspase对PARP的裂解作用

Western blot,**沉降,**组织化学

细胞粗提物

Anti-Poly( ADP-Ribose) Polymerase (PARP)

100 μl (50 blots)

11835238001

相关信息
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