智慧彩票

产品详情
  • 产品名称:GE percoll PLUS **细胞分离液

  • 产品型号:
  • 产品厂商:GE Healthcare
  • 产品价格:0
  • 折扣价格:0
  • 产品文档:
你添加了1件商品 查看购物车
简单介绍:
GE percoll PLUS **细胞分离液 江苏弘麒生物GE percoll PLUS **细胞分离液现货供应 GE percoll PLUS **细胞分离液
详情介绍:

GE percoll PLUS **细胞分离液

品牌

货号

品名

规格

目录价(元)

促销价(元)

GE Healthcare

17-0891-01

Percoll**细胞分离液

1L

¥3712.00

¥3155.00

GE Healthcare

17-0891-02

Percoll**细胞分离液

250ml

¥1365.00

¥1019.00

GE Healthcare

17-0891-01-1

Percoll**细胞分离液

100ml

¥650.00

¥450.00


GE percoll PLUS **细胞分离液描述:

一、原理
Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低(<20mosm/kg H2O), 粘度也很小,可形成高达1.3g/ml密度,采用预先形成的密度梯度时可在低离心力(200~1000g)于数分至数十分钟内达到满意的细胞分离结果。由于GE percoll PLUS **细胞分离液扩散常数低,所形成的梯度十分稳定。此外,GE percoll PLUS **细胞分离液不穿透生物膜,对细胞无毒害,因此广泛用于分离细胞、亚细胞成分、**及病毒,还可将受损细胞及其碎片与完好的活细胞分离。
二、操作方法及注意事项
1. 不同浓度(密度)Percoll溶液的制备: 先用9份Percoll与1份8.5%NaCl或1.5MPBS混合达到生理性渗透压,然后用生理溶液(0.85% NaCl或0.15M PBS)稀释到所需浓度。
Percoll浓度(%): 70       60     50    40     30    20
比重g/ml  :  1.090           1.077       1.067      1.056      1.043       1.031
2. 不连续密度梯度Percoll层的制备: 先将试管壁用牛血清湿润,除去多余血清,这种预处理可使逐层叠加的Percoll液平稳沿管壁流下,使形成满意的界面。在制备过程中一般用长针头注射器从高密度向低密度逐层放置,有时相邻两层Percoll比重相差不大时,可将GE percoll PLUS **细胞分离液放入注射器中,小针头斜面紧贴管壁,任其自然慢慢流下。
3. 装样:样品体积和细胞浓度根据不同细胞而异,一般加样体积不宜过大,细胞浓度也不可过高,否则会影响细胞的分离和回收。
4. 离心:一般采用离心力为400g,时间20~25min。由于多层Percoll之间密度差别不大,因此离心机加速、降速时要慢,要平稳。
5. 取样:当所要分离的细胞绝大部分在两层的界面时,可逐层去除Percoll液后收集界面部位的细胞;有时大部分细胞位于Percoll层中,则需要逐层收集。收获含有Percoll液的细胞经2次洗涤后可供培养或检测用。
三、分离纯化细胞举例
1. 富含NK活性大颗粒**细胞(LGL)的纯化:按顺序由下向上逐层加50%、47.5%、45%、42.5%和40%五种不同密度的Percoll,如用10ml试管(或塑料管)分离,每层Percoll约1.2~1.5ml,初步从外周血中分离的PBMC细胞1×108悬于1ml培基中,按要求装样、离心和取样。一般富含NK杀伤活性的LGL细胞位于42.5%与45%Percoll界面以及上下二层的Percoll液中。
2. 纯化**母细胞和除*细胞:分别叠加50%和30%Percoll液。收取经PHA(或其它抗原、有丝分裂原)刺激PBMC,或含有较高比例异型的PBMC(如肾综合征出血热患者),按要求装样、离心和取样。位于管底的**细胞为小**细胞;两层Percoll之间为**母细胞,纯度和回收率在80%以上,位于30%Percoll表面是死细胞。收获**母细胞可进行表型、结构以及功能的研究。
四、人不同血细胞的漂浮密度

细 胞 漂浮密度 细 胞 漂浮密度
红细胞 1.09-1.11 **细胞 1.052-1.077
嗜酸性粒细胞 1.09-1.095 B**细胞 1.062-1.075
嗜中性粒细胞 1.080-1.085 T**细胞 1.065-1.077
单核细胞 1.050-1.066 **母细胞 1.065-1.077
血小板 1.030-1.060 自然杀伤细胞 1.050-1.070

五、GE percoll PLUS **细胞分离液相关问题
问:percoll连续梯度怎么配制?比如15%---75%的percoll连续梯度?

答:根据实验需要的具体密度梯度决定的,根据要分离的不同细胞种类,数量等等,也有用原液配的。也有用80%配的,不一定的。另外,percoll本身是低渗透压的,要用高渗透压溶液配成生理等渗透压溶液,然后使用,不然,细胞容易破裂。一般是先用9份Percoll与1份8.5%NaCl或1.5MPBS混合达到生理性渗透压,然后用生理溶液(0.85% NaCl或0.15M PBS)稀释到所需浓度。即取Percoll原液与10倍浓缩的PBS以9:1的比例混合,此时溶液为100%Percoll,比重是1.127,毫克分子渗透压浓度为290mOsmol/kg

Percoll浓度(%) : 70         60          50         40         30         20
比重g/ml        : 1.090   1.077    1.067    1.056    1.043     1.031
Sigma公司的同等产品: Histopaque -1119(11191)

相关信息
标题:
内容:
联系人:
联系电话:
Email:
公司名称:
联系地址:
 
 
注:1.可以使用快捷键Alt+S或Ctrl+Enter发送信息!
2.如有必要,请您留下您的详细联系方式!

苏公网安备 32011202000132号

友情链接:三分彩  一分彩官网  五分彩  一分彩  一分彩官网  三分彩  五分彩  

免责声明: 本站资料及图片来源互联网文章,本网不承担任何由内容信息所引起的争议和法律责任。所有作品版权归原创作者所有,与本站立场无关,如用户分享不慎侵犯了您的权益,请联系我们告知,我们将做删除处理!